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닫기Gene Cloning and DNA analysis (4th edition)
by T. A. BROWN
Part 1; The Basic Principles of Gene Cloning and
DNA analysis
-- Chapter 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 장
Part 2; The Applications of Gene Cloning and DNA analysis in research
-- Chapter 10(197-200), 11.
Glossary (p341-355)
* 단백질에 대한 강의(2011. 8. 24. SBS, 2010? 노벨화학상 수상자)
단백질은 변성된다.
고기; 25C에서 6시간 보관하면 변성-- 악취냄새--먹지 못하도록 신호
살아있는 사람;37C에서도 변성되지 않는다 -- 살아있는 유기체이기 때문
--- 단백질은 항상 변성되어 분해되고 새로이 재생되기 때문
사람은 적당한 범위내에서 단백질이 재생된다(범주를 벗어나면 단백질 변성으로 인해 사망)
-- 정상인의 경우 하루 5-7% 단백질이 변성되어 분해되고 재생된다.
-- 한달이면 모든 단백질이 새로이 교체
단백질 제거 문제로 질병 유발; 2가지 방법
1. 단백질 분해 문제시; 변성된 단백질이 제거 되지 못하고 축적되어 파킨스,
알쯔하이머(뇌 세포에 단백질이 축적되어 기억 상실증 유발)등이 유발
2. 단백질의 분해와 조절이 되지 않는 경우; (자동차 엑설과 브레이크 관계와 유사)
-- 분해가 되지 않는 경우 단백질이 계속 생산되어 암 유발
사람의 유전자는 약 2,200개 예상???
CHAP. 1. Why Gene cloning and DNA analysis
are important
(1) Genetics 탄생
1860년대 Mendel의 유전현상-유전법칙(우성;열성)
gene --- Genetics
1903; W. Sutton-- gene, chromosome
1910; Morgan-- gene mapping
(2) 1940-1970년
1940-1950; Avery외 여러 학자들이 유전물질은 DNA
1950; Watson & Click DNA 구조
-- DNA 구조, 전사, 해독과정이 알려짐
(3) 1970년대 이후
Gene cloning --- Recombinant DNA Technology(Genetic engineering)
--- DNA sequencing technique --- Studying of gene regulation
--- Biotechnology (Medicine & Induetrial precesses)
--- PCR (Polymerase Chain Reaction, 1980년대)
--- medicine, agriculture, biotechnology
* Gene Cloning
1. Construction of a recombinant DNA
1) preparation of DNA
2) digestion of DNA
3) analysis of DNA fragment
4) joining DNA fragments together (vector + interest gene)
2. Transport into the host cell
3. Multiplication of recombinant DNA molecule
4. Division of host cell
5. Numerous cell divisions resulting in a clone
6. Identification of clone that contains recombinant DNA
* PCR
D.S DNA + primer + dNTP + Taq DNA polymerase
1. denaturation (94oC, 1min)
2. annealing (56oC, 1min)
3. synthesis (74oC, 2min)
4. repeat 25 cycle
* Why Gene cloning and PCR are important
-- provide an individual gene separated from all the other genes in the cell
(1)Gene isolation by cloning
The key of gene cloning; ability to identify the particular interest clone
from many different clones
(2) Gene isolation by PCR
* limitation PCR
1. In order to the primer to anneal,
the sequence of annealing sites must be known.
2. The length of DNA sequence copied by PCR