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목원대학교미생물생명공학과


DIVISION OF MICROBIAL LIFE INDUSTRY

바이오 경제시대를 선도하는 미생물생명산업 전문인력 양성

강의자료실

MEGA program을 사용한 Phylogenetic tree 작성법

작성자 한** 작성일 2020.10.23 조회수10128

 

 

 

1. 메모장을 사용하여 샘플의 이름 및 sequence를 기입

바른 예)

>Sequence_1

GAATTC---

틀린 예)

>Sequence 1

GAATTC---

※ '>' 부호는 A, T, G, C 가 아닌 일반 텍스트로 인식합니다.

※ 샘플 이름에 공란이 있으면 안됩니다. (띄어쓰기 하면 안됨)

    (MEGA 프로그램에서는 공란있어도 가능하지만요)

※ sequence는 대문자, 소문자 무관합니다.

※ 각 샘플들 사이에 줄 띄우기는 있어도, 없어도, 한줄 띄워도, 두줄 띄워도 무관합니다.

 

 

2. 파일 저장

(파일 - 다른이름으로 저장 - 파일형식 : 모든 파일 - 저장할 sequence이름.fas)

 

예)

일반적인 저장 : Sequence_1.txt

변경해야할 저장 : Sequence_1.fas

틀린 예)

Sequence 1.fas

※ 역시 파일 이름에 공란이 있으면 안됩니다. ( _ 사용하세요)


3. MEGA program 사용

[Align] - [Edit/Build Alignment]

 

 

 
[Create a new alignment] - [OK]

 

 

 
[DNA]

 

 

 
[Open]
 
[Sequence_1.fas] - 열기
 

 

 

위와 같은 모습으로 나옵니다.
 
Ctrl + A 해서 모두 선택 후 - [W] 모양 버튼 - [Align DNA]
 
※ 중요한 부분입니다

 Phylogenetic tree는 일정한 염기서열에서 차이를 확인하는 것이기 때문에 

공통된 부분 이외의 부분을 잘라내어야 합니다.

 하나라도 - 로 표기된 부분이 없는 부분만 사용하고 나머지는 [delete]키를 눌러 삭제합니다

 
다음과 같이 되면 데이터 저장을 해야겠죠.
[Data] - [Export Alignment] - [MEGA format]
 
마찬가지로 저장을 해줍니다 (파일형식이 자동적으로 MEGA format으로 저장됩니다)
 
다시 MEGA 기본화면으로 돌아가서 [Phylogeny] - [Construct/Test Neighbor-Joining Tree...]

 

 

조금전에 저장한 MEGA format의 파일 선택하여 open 하면
 
다음과 같은 창이 하나 뜨게 되는데

 

[Test of Phylogeny] - [Bootstrap method] 선택

[No. of Bootstrap Replications] - 1000 기입 (500 해도 상관없음)

(기본으로 500 설정되어 있는데, 이는 몇번 반복 실행을 하여 같은 결과가 나오는지를 나타냅니다.)

이후 [Compute]

 

 

 

원하는 Phylogenetic tree가 나오게 됩니다.

출처 : http://blog.daum.net/kimuks/7540388